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關(guān)于數(shù)碼顯微鏡困擾您的 9 個(gè)問題
James DeRose 博士 Georg Schlaffer
徠卡顯微系統(tǒng)
數(shù)碼顯微系統(tǒng)是顯微鏡學(xué)的流行語之一,此外,還有一些非常有用的常識。徠卡顯微系統(tǒng)的產(chǎn)品經(jīng)理 Georg Schlaffer 常常會被客戶和同仁問及有關(guān)數(shù)碼顯微系統(tǒng)方面的問題。為了答疑解惑,他與科學(xué)作家 Jim DeRose 共同合作,對重要的幾個(gè)問題進(jìn)行了全面解答。
到底什么是數(shù)碼顯微系統(tǒng)?
數(shù)碼顯微鏡屬于帶數(shù)碼相機(jī)的光學(xué)顯微鏡,無需配備目鏡。電子監(jiān)控器顯示屏?xí)苯语@示觀察和分析的樣品圖像。數(shù)碼顯微鏡還可以是常規(guī)體視或復(fù)式顯微鏡,它們同時(shí)配備目鏡和相機(jī),能夠保存顯微鏡狀態(tài)和相機(jī)設(shè)定值的反饋信息。在本文的接下來部分中,我們提到的“數(shù)碼顯微鏡"是指不帶目鏡的顯微鏡,例如,Leica DVM6、Leica DMS1000,和 Leica DMS300,而不是配備相機(jī)的體視或復(fù)式顯微鏡。
左:Leica DVM6 數(shù)碼顯微鏡
右:鍍金焊盤,汽車用電子設(shè)備,總放大倍率:120:1。圖像由 Leica DVM6 獲取。
哪些應(yīng)用領(lǐng)域可以使用數(shù)碼顯微鏡?
在研發(fā)、生產(chǎn)和檢測、質(zhì)量控制和保證,以及失效分析過程中,數(shù)碼顯微鏡是分析部件和樣品并生成檢測報(bào)告的理想儀器。
左:鍍金焊盤,汽車用電子設(shè)備,總放大倍率:360:1。圖像由 Leica DVM6 獲取。
右:通過 Leica DVM6 傾斜顯示屏予以顯示。
數(shù)碼顯微鏡的優(yōu)勢何在?
數(shù)碼顯微鏡顯著的優(yōu)勢在于儀器的人機(jī)工程學(xué)設(shè)計(jì)。由于監(jiān)控器會直接顯示樣品圖像,用戶可以在保持舒適、放松的直立坐姿的同時(shí),還能即時(shí)觀察樣品,并利用軟件分析樣品圖像,保證用戶能以舒適的姿態(tài)高效地完成工作。在需要處理高通量樣品,或每天需要在顯微鏡上花費(fèi)較長時(shí)間的情況下,數(shù)碼顯微鏡的人機(jī)工程學(xué)設(shè)計(jì)就顯得意義非凡了。此外,很多數(shù)碼顯微鏡還提供允許存儲多個(gè)用戶配置文件的軟件。在多人共用一臺顯微鏡時(shí),這項(xiàng)功能非常有用,憑借這項(xiàng)功能,每個(gè)用戶只需選擇自己的顯微鏡配置文件,幾乎無需調(diào)節(jié)顯微鏡工作臺,即可輕松開始工作。
左:紙上印刷圖案,總放大倍率:750:1,環(huán)形光照明。圖像由 Leica DVM6 獲取。
右:紙上印刷圖案,總放大倍率:750:1,起偏鏡開啟時(shí)的同軸照明。圖像由 Leica DVM6 獲取。
數(shù)碼顯微鏡有哪些限制條件?
相比體視或復(fù)式顯微鏡,數(shù)碼顯微鏡存在一個(gè)明顯的限制條件,即需要電源連接,因?yàn)閿?shù)碼顯微鏡未配備目鏡,而樣品圖像卻始終需要顯示在監(jiān)控器上。因此,至少需要一根電源線。通常情況下,數(shù)碼顯微鏡還需要連接 PC,或至少需要連接顯微鏡的顯示屏。通過傳統(tǒng)的顯微鏡,用戶仍可以選擇使用目鏡獲取樣品圖像。
左:Leica DMS1000 數(shù)碼顯微鏡
右:金屬部件上的一個(gè)孔;自動更新每項(xiàng)變焦設(shè)置比例,實(shí)現(xiàn)快速測量。圖像由 Leica DMS1000 獲取。
通過數(shù)碼顯微鏡和目鏡分別觀察到的樣品圖像相比,結(jié)果如何?
原則上,圖像是相同的。視場角可能存在差別,這主要取決于我們正在討論的數(shù)碼相機(jī)和目鏡的類型。但是,還有一個(gè)重要差別:采用體視顯微鏡的雙筒目鏡觀察樣品,將為您帶來數(shù)碼顯微鏡的二維圖像無法達(dá)到的深度。
左:表殼,通過環(huán)形光照明 (Leica LED3000 RL) 和入射光座捕捉。圖像由 Leica DMS1000 獲取。右:Leica DMS1000 B 圖像:利用透射光座捕捉的秀麗隱桿線蟲圖像;因不斷編碼變焦,從而保證快速、簡單地測量,即使在不配備電腦的單機(jī)模式下亦可實(shí)現(xiàn)。
數(shù)碼顯微鏡操作上比帶目鏡的顯微鏡要簡單嗎?
尤其對于無經(jīng)驗(yàn)的用戶而言,利用數(shù)碼顯微鏡,他們也能夠更簡單、更快速地獲取樣品圖像。造成上述差別的主要原因是,熟悉設(shè)置和調(diào)整傳統(tǒng)型顯微鏡,并透過目鏡觀察樣品,這些操作需要花費(fèi)較長時(shí)間。
左:果蠅屬篩查。圖像由 Leica DMS1000 B 獲取。
右:利用固定在搖臂機(jī)架上的 Leica DMS300 觀察印刷電路板樣品
“編碼"的含義是什么?
當(dāng)顯微鏡硬件可直接與計(jì)算機(jī)軟件進(jìn)行通信,且能夠利用圖像數(shù)據(jù)完成對特定參數(shù)值的追蹤和保存時(shí),表示顯微鏡已完成“編碼"。這些特定參數(shù)將得以被設(shè)定,并因此被稱之為已編碼參數(shù)值。正常情況下,觸摸相關(guān)按鈕,即可調(diào)用這些已編碼參數(shù),令重復(fù)工作和報(bào)告變得更輕松。
必須成為顯微系統(tǒng)的專家,才能操作數(shù)碼顯微鏡嗎?
當(dāng)然不需要。無論是顯微系統(tǒng)的新手還是專家,都可以輕松使用數(shù)碼顯微鏡。徠卡顯微系統(tǒng)提供的數(shù)碼顯微鏡,其設(shè)計(jì)宗旨就是簡單易用、開箱即用,大大地減少培訓(xùn)時(shí)間。它們配備已編碼的功能,能夠輕松生成分析報(bào)告,令重復(fù)工作更加高效。
數(shù)碼顯微鏡需要配備哪些部件?
所需配件依據(jù)應(yīng)用領(lǐng)域而定。例如,可以根據(jù)所需的放大倍率范圍,選擇物鏡透鏡。您還可以在一系列主機(jī)和照明系統(tǒng)中進(jìn)行選擇。
以下這些問題會幫助您決定需要哪些部件或功能:
是否需要快速獲取高質(zhì)量數(shù)字圖像?如果需要,您可以選擇高分辨率數(shù)碼相機(jī)。
是否需要高通量樣品的快速、實(shí)時(shí)圖像顯示?如果需要,您可以將相機(jī)速度設(shè)置為每秒 30 幀或更快。
是否需要從不同角度觀察樣品?如果需要,傾斜顯微鏡鏡頭或轉(zhuǎn)動樣品載物臺,實(shí)現(xiàn)工作過程或物體的動態(tài)觀測。
是否需要定性或定量分析樣品?如果需要,必須認(rèn)真選擇軟件功能。
是否需要平衡圖像,同時(shí)清晰展示明亮和暗色部分?如果需要,您可以選擇 HDR(高動態(tài)范圍)功能,它能夠?yàn)槟峁┧璧膱D像類型。